前言
年,欧易/鹿明生物合作客户南京农业大学顾振新教授在FoodChemistry杂志(IF:6.)发表了题为“iTRAQ-basedproteomicanalysisrevealschangesinresponsetosodiumnitroprussidetreatmentinsoybeansprouts”的研究论文,通过iTRAQ标记定量蛋白质组学发现硝普钠(NO供体)处理调节参与抗氧化系统和脂质过氧化相关蛋白质的表达,为生产有益于人体健康的功能性食品提供理论指导。研究中iTRAQ标记定量蛋白质组学实验由鹿明生物提供技术支持。
中文标题:iTRAQ标记定量蛋白质组分析揭示硝普钠处理对大豆芽的影响
研究对象:大豆芽
发表期刊:FoodChemistry
影响因子:6.
合作单位:南京农业大学
发表时间:年9月
运用欧易/鹿明生物技术:iTRAQ标记定量蛋白质组学(由鹿明生物提供技术支持)
研究背景
近年来,一氧化氮(NO)已被认为是一种可增强抗氧化系统和类*酮化合物产生的植物信号化合物。硝普钠,一种NO供体,已经被证明可以通过增强抗氧化系统来减轻UV-B胁迫造成的损害以及减轻脂质过氧化损害。然而,NO诱导的抗氧化系统和类*酮生物合成相关的蛋白质作用机制仍不清楚。
研究方法
研究结果
1.硝普钠处理后差异表达蛋白质的鉴定
通过iTRAQ蛋白质组学技术共鉴定出种蛋白质,其中差异表达蛋白质种,差异蛋白质占8.4%。差异蛋白质参与多种生物过程,包括单体代谢过程(16.40%),氧化还原过程(13%),刺激反应(8.60%)和压力反应(8.20%)(图1)。因此,NO供体硝普钠通过调节植物生理的许多过程,特别是代谢和氧化应激反应,有力地重塑了大豆芽的蛋白质组。
图1
利用iTRAQ蛋白质组学鉴定分析差异表达蛋白质的功能分类
2.氧化还原相关蛋白质分析
硝普钠调节的差异表达蛋白中,属于氧化还原家族的蛋白列表见表1。其中1个H型硫氧还蛋白质(gi
)表达量显著上调,4个SOD蛋白质(gi
,gi
,gi
,gi
)表达量显著上调,2个SOD蛋白质(gi
,gi
)无显著变化。13个POD蛋白质中,6个POD蛋白质(gi
,gi
,gi
,gi
,gi
,gi
)表达量显著上调,7个POD蛋白质(gi
,gi
,gi
,gi
,gi
,gi
,gi
)无显著变化。仅1个CAT蛋白(gi
)被鉴定到,且表达量显著上调。
表1
硝普钠处理后大豆芽中差异表达的活性氧相关蛋白质
Foldchange是CK和硝普钠处理组的蛋白质表达量差异倍数。Foldchange1.5代表显著上调,Foldchange0.67代表显著下调。Foldchange在1.5-0.67之间的代表无显著差异。
除了调节抗氧化酶,硝普钠还调节抗坏血酸-谷胱甘肽循环酶的表达。其中单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)(gi
)表达量显著上调;4个APX蛋白质中,1个APX蛋白质(gi
)表达量显著上调,3个APX蛋白质无显著变化(gi
,gi
gi
);2个GR蛋白质(gi
,gi
)表达量显著上调;10个GST蛋白质中,3个GST蛋白质(gi
,gi
,gi
)表达量显著上调,1个GST蛋白质(gi
)表达量显著下调,6个蛋白质(gi
,gi
,gi
,gi
,gi
,gi
)无显著变化。
3.脂质过氧化相关蛋白质分析
硝普钠处理后,丙二烯氧化物合成酶(gi
)和3个脂氧合酶(LOX)亚型(gi
,gi
,gi
)表达量均显著下调,而其余2个LOX亚型(gi
,gi
)表达量无显著变化(表2),表明硝普钠(NO供体)通过下调大豆芽中脂质过氧化相关的蛋白质,保护细胞膜免受损伤。
表2
硝普钠处理后大豆芽中差异表达的脂质过氧化相关蛋白质
Foldchange是CK和硝普钠处理组的蛋白质表达量差异倍数。Foldchange1.5代表显著上调,Foldchange0.67代表显著下调。Foldchange在1.5-0.67之间的代表无显著差异。
4.热休克蛋白质家族分析
鉴定出三个热休克蛋白质(HSP)亚型,其中热休克同源蛋白质80(gi
)和热休克蛋白质90-2(gi
)的表达量显著上调,17.3kDaⅠ类热休克蛋白质(gi
)表达量显著下调(表3)。
表3
硝普钠处理后大豆芽中差异表达的热休克蛋白质
Foldchange是CK和硝普钠处理组的蛋白质表达量差异倍数。Foldchange1.5代表显著上调,Foldchange0.67代表显著下调。Foldchange在1.5-0.67之间的代表无显著差异。
5.类*酮生物合成相关蛋白质分析
鉴于类*酮对人类健康有着重要的作用,实验研究了类*酮生物合成过程中涉及的蛋白质。肉桂酸4-羟化酶(gi
)、查尔酮合酶(gi
)、异*酮合酶(gi
)和异*酮还原酶(gi
)表达量均显著上调。1个查尔酮异构酶亚型(gi
)表达量上调,而另2个异构体(gi
,gi
)表达量下调(表4)。因此,硝普钠处理能增加类*酮合成相关蛋白质的表达。
表4
硝普钠处理后大豆芽中差异表达的类*酮生物合成过程相关蛋白质
Foldchange是CK和硝普钠处理组的蛋白质表达差异倍数。Foldchange1.5代表上调,Foldchange0.67代表上调。Foldchange在1.5和0.67之间的代表物显著差异。
研究结论
iTRAQ蛋白组学定量分析数据表明,硝普钠(NO供体)处理调节参与抗氧化系统和脂质过氧化相关蛋白质的表达。此外,热休克家族蛋白和类*酮生物合成蛋白质也收到硝普钠(NO供体)的调节。本研究可为生产有益于人体健康的功能性食品提供理论指导。
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参考文献:
Caifeng,Jiao,etal.iTRAQ-basedproteomicanalysisrevealschangesinresponsetosodiumnitroprussidetreatmentinsoybeansprouts[J].FoodChemistry,,:-
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文章来源于鹿明生物