诊断强直性脊柱炎有些困难，因为：
腰痛是常见的问题，通常由肌肉酸痛或骨关节炎等其他情况引起。
X光通常是正常的，特别是在疾病的早期阶段。
虽然早期识别强直性脊柱炎是一个挑战，但早期诊断是理想的。当病人被早期诊断时，他们可以在疾病进展得很远之前就开始治疗，帮助他们保持关节的灵活性和运动能力。
在诊断过程中，医生将检查病人的病史，进行身体检查，并在必要时进行诊断测试，如x光和血液测试。
医学影像
脊椎底部骶髂关节炎症是强直性脊柱炎最明显的征象之一。然而，病人可能会感觉到骶髂炎或其他背痛，几年前，脊柱的解剖变化可以看到x射线。
磁共振成像(MRI扫描)，猫扫描(CT扫描)和超声可以提供更准确和详细的图像，帮助医生识别关节早期的变化。这些医学成像技术比x射线更昂贵、更耗时，因此它们只是在需要时才能完成。
血检
没有单独的实验室测试可以用来诊断强直性脊柱炎。相反，各种血液测试可以帮助排除强直性脊柱炎的诊断或提供证据。除常规全血计数(CBC)外，医生还可下令进行下列检查：
C反应蛋白(CRP)当身体发炎时，肝脏产生一种叫做CRP的蛋白质。较高的CRP水平表示炎症状态，包括感染。因此，较高的CRP水平并不意味着患者患强直性脊柱炎。除了用于诊断外，医生还经常监测CRP水平，以衡量患者对治疗的反应。
血沉。类似于CRP，这项测试也会检查炎症反应。由于炎症是在许多情况下的一个因素，这项测试不是特定于强直性脊柱炎，本身不能诊断病人，但它可以支持诊断。它还用于查看条件的活动情况。
Hla-B27基因大多数强直性脊柱炎患者携带一种名为HLA-B27的基因。这个基因的阳性检测可以帮助确认强直性脊柱炎的疑似病例，但是当病人有几个明显的症状时，或者在x光上可以看到骶髂炎的时候，这个测试是不需要的。
医生还可以命令其他血液检查排除其他可能的诊断，包括脊柱或骨肿瘤、感染、盆腔炎、代谢性骨病、弥漫性特发性骨骼肥大症(DISH)和椎间盘脱垂。
例如，医生可能会下令检测类风湿因子，一种抗体(蛋白质)。这种蛋白质经常存在于高水平的血液中。类风湿关节炎和狼疮，但不是强直性脊柱炎患者。(由于这个原因，强直性脊柱炎被称为血清阴性脊椎关节病-血清是负类风湿因子。)
看专科医生
如果医生怀疑病人患有强直性脊柱炎，他或她可能会将病人转介至风湿学家。风湿科医生是一位训练有素的医生，能够识别强直性脊柱炎的症状和类似的情况。风湿科医生通常会在排除或诊断强直性脊柱炎患者之前进行病史、体格检查和其他检查。