β-CGRP,humanTFA(Humanβ-CGRPTFA)是一种降钙素肽,通过降钙素受体样受体CRLR与RAMP的复合物起作用。
编号:
中文名称:β-CGRP,humanTFA
英文名:CalcitoninGeneRelatedPeptideII,human,CGRP-II
CAS号:-82-2
单字母:H2N-ACNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTNVGSKAF-NH2(DisulfideBridge:C2-C7)
三字母:H2N-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Met-Val-Lys-Ser-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2(DisulfideBridge:Cys2-Cys7)
氨基酸个数:37
分子式:CHN51O48S3
平均分子量:.36
精确分子量:.92
等电点(PI):-
pH=7.0时的净电荷数:7.15
平均亲水性:-0.
疏水性值:0.22
标签:二硫键环肽降钙素
二硫键广泛存在与蛋白结构中,对稳定蛋白结构具有非常重要的意义,二硫键一般是通过序列中的2个Cys的巯基,经氧化形成。
形成二硫键的方法很多:空气氧化法,DMSO氧化法,过氧化氢氧化法等。
二硫键的合成过程,可以通过Ellman检测以及HPLC检测方法对其反应进程进行监测。
如果多肽中只含有1对Cys,那二硫键的形成是简单的。多肽经固相或液相合成,然后在pH8-9的溶液中进行氧化。
当需要形成2对或2对以上的二硫键时,合成过程则相对复杂。尽管二硫键的形成通常是在合成方案的最后阶段完成,但有时引入预先形成的二硫化物是有利于连合或延长肽链的。通常采用的巯基保护基有trt,Acm,Mmt,tBu,Bzl,Mob,Tmob等多种基团。我们分别列出两种以2-Cl树脂和Rink树脂为载体合成的多肽上多对二硫键形成路线:
二硫键反应条件选择
二硫键即为蛋白质或多肽分子中两个不同位点Cys的巯基(-SH)被氧化形成的S-S共价键。一条肽链上不同位置的氨基酸之间形成的二硫键,可以将肽链折叠成特定的空间结构。多肽分子通常分子量较大,空间结构复杂,结构中形成二硫键时要求两个半胱氨酸在空间距离上接近。此外,多肽结构中还原态的巯基化学性质活泼,容易发生其他的副反应,而且肽链上其他侧链也可能会发生一系列修饰,因此,肽链进行修饰所选取的氧化剂和氧化条件是反应的关键因素,反应机理也比较复杂,既可能是自由基反应,也可能是离子反应。
反应条件有多种选择,比如空气氧化,DMSO氧化等温和的氧化过程,也可以采用H2O2,I2,汞盐等激烈的反应条件。
空气氧化法:空气氧化法形成二硫键是多肽合成中最经典的方法,通常是将巯基处于还原态的多肽溶于水中,在近中性或弱碱性条件下(PH值6.5-10),反应24小时以上。为了降低分子之间二硫键形成的可能,该方法通常需要在低浓度条件下进行。
碘氧化法:将多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中,逐滴滴加10-15mol/L的碘进行氧化,反应15-40min。当肽链中含有对碘比较敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时,氧化条件要控制的更精确,氧化完后,立即加入维生素C或硫代硫酸钠除去过量的碘。当序列中有两对或多对二硫键需要成环时,通常有两种情况:
自然随机成环:序列中的Cys之间随机成环,与一对二硫键成环条件相似;
定点成环:定点成环即序列中的Cys按照设计要求形成二硫键,反应过程相对复杂。在固相合成多肽之前,需要提前设计几对二硫键形成的顺序和方法路线,选择不同的侧链巯基保护基,利用其性质差异,分步氧化形成两对或多对二硫键。通常采用的巯基保护基有trt,Acm,Mmt,tBu,Bzl,Mob,Tmob等多种基团。
定义
降钙素基因相关肽(CGRP)是具有有效受体介导的血管舒张和心脏兴奋特性1的37个氨基酸的神经肽。
发现
当降钙素基因的RNA转录物的替代加工被显示导致产生编码CGRP2的独特mRNA时,就发现了这一点。从甲状腺髓样癌患者的甲状腺组织中分离到人形式的CGRP3。
分类
CGRP属于调节肽家族,还包括肾上腺髓质素和胰岛淀粉样多肽4。
结构特征
CGRP由氨基酸2和7之间的氨基末端二硫桥连接环组成,随后是氨基酸8和18之间的α螺旋以及残基19和之间的界限不清。CGRP的羧基和氨基末端可以与其受体5独立相互作用。
行动方式
CGRP通过与两个G蛋白偶联受体CGRP1和CGRP2结合而发挥其功能。CGRP的主要功能之一是心肌血管舒张5。为了实现这一目标,CGRP首先与CGRP1受体结合,从而导致cAMP的产生,进而激活蛋白激酶A(PKA)6。PKA磷酸化并打开钾通道,引起肌肉松弛6。
功能
CGRP广泛分布于中枢神经系统和周围神经系统5。它通过结合CGRP1受体5产生血管松弛。小鼠研究表明,CGRP可能在控制血压中发挥作用5。CGRP还通过其血管舒张功能保护组织损伤。通过其作为血管扩张剂的活性,CGRP通过在炎症部位募集更多的细胞来影响炎症细胞的活性7。CGRP在偏头痛中起着作用,因为发现它的水平在疾病的疼痛阶段8升高。CGRP在心脏组织中起保护作用。CGRP的输注有利于充血性心力衰竭患者增加心输出量和降低血压5。