组织及血液酸性磷酸酶（ACP）活性检测试剂盒（微量法）
产品货号：BA
产品规格：管/48样
产品简介：
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸，常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。在酸性环境中，ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚，苯酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应生成红色亚醌衍生物，在nm有特征光吸收；通过测定nm吸光度增加速率，来计算ACP活性。注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品组成：
溶液的配制：1、标准品：10μmol/mL酚标准液，临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL备用。
操作步骤（仅供参考）：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织样本：称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，00rpm离心10min，取上清液待测。
血浆（血清）：血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用提取液稀释。
二、测定步骤
1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于37℃水浴中预热30min以上。
3.操作表：
三、ACP活性计算
1.按蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
ACP酶活(U/mgprot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T=0.×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
2.按样本质量计算
活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
ACP酶活(U/g质量)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(W÷V提取×V样)÷T=0.×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
3.按血液体积计算
活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
ACP酶活(U/mL)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷V样÷T=0.×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
C标准品：标准品浓度，2.5μmol/mL；V样：加入反应体系中上清液体积，0.02mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；T：反应时间，15min；V提取：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1.试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。
2.试剂三变蓝绿色后不能再使用。
3.加入试剂三后必须立即混匀，否则显色不完全。
4.ACP不稳定，尤其在37℃和pH大于7的条件下活力丧失快，因此酸性磷酸酶样本一般需当天准备；血清样本中，每毫升血清中加入10mg柠檬酸氢二钠或者5mg硫酸氢钠，使pH降至6.5以下，或5mL血清加入30%醋酸溶液2～3滴，置于4℃可保存1周。