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吐血整理的5种蛋白磷酸化检测方法,建议收 [复制链接]

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蛋白质翻译后修饰(PTMs)在生命体中具有十分重要的作用,它使蛋白质的结构更复杂,功能更完善,调节更精细,作用更专一。蛋白翻译后修饰包括:磷酸化、糖基化、甲基化、羟基化、脂酰化、羧基化等共价修饰(具体可参见“带你了解关于蛋白质翻译后修饰的简单介绍”一文)。其中,蛋白磷酸化是最常见、最重要、研究最多的翻译后修饰,它在每个生物的各个方面都扮演着重要的角色,例如基因转录、表达、细胞增殖、分化、凋亡、信号转导、免疫调控、肿瘤发生等。

一、蛋白磷酸化简介

蛋白质磷酸化是指在蛋白激酶催化作用下,把来自三磷酸腺苷(ATP)γ位的磷酸基团共价连接到底物蛋白氨基酸残基(丝氨酸(~86%)、苏氨酸(~12%)或酪氨酸(~2%))上,被激酶去除并被磷酸酶去除的过程。该过程是可逆的,催化蛋白质发生磷酸化的酶被称为蛋白激酶(ProteinKinase,PK),而催化蛋白质去磷酸化的酶被称为蛋白磷酸酶(ProteinPhosphatase,PPase)。磷酸化可以改变蛋白质的结构、功能和相互作用,是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍,也是最重要的机制。因此,磷酸化在体内平衡和疾病的几乎所有细胞过程中都起着至关重要的作用。更重要的是,不同残基的磷酸化会导致不同的结果。例如,RAF1是MAPK通路的核心激酶,当它在丝氨酸(S)或苏氨酸(T)残基S、S、S/、T或S处发生磷酸化时会被激活。然而,在S//发生磷酸化则会导致RAF1激酶活性的抑制。因此,了解磷酸化的特定位点和水平对于了解细胞信号传导和表型至关重要。

图1磷酸信号网络:蛋白质磷酸化和去磷酸化过程(FatimaAetal.,)。

蛋白质磷酸化的分析和磷酸化位点的鉴定已成为目前蛋白质组学研究的

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